· 聚丙烯酰胺凝胶必须由丙烯酰胺单体，聚合起始材料，催化剂以及盐和缓冲液混合物的右侧。
· 丙烯酰胺和bis（n，n' - 亚甲基双丙烯酰胺）是单体形式的凝胶基质。
·过硫酸铵开始粘附聚合过程。胶水的配方需要在水中制备的10％过硫酸铵溶液。大多数信息表明需要积极使用。但是，10％的溶液可以将其放置在4°℃中，而不会显着丧失活性。胶水无法汇总时，最多可弥补10毫升并丢弃。
提示：百分比丙烯酰胺在测序中，胶水和蛋白质胶是不同的。如果使用预制的丙烯酰胺：bis解决方案，请确保获得合适的瓶子。
·Temed（N，N，N，N'，N' - 四甲基二胺）是放在冰箱中的棕色瓶中的催化剂。在倒胶之前添加。
·每次之前和之后应洗涤在电泳中使用的聚丙烯酰胺电泳。电泳后，用软刷和布在热肥皂水中洗涤，用蒸馏水冲洗干净并干燥。
·空心聚合物会导致水分和灰尘。电泳之前，用玻璃清洁剂清洁玻璃板，然后用软刷擦拭。用蒸馏水洗涤，并用纸擦拭彻底干燥。用70％的乙醇冲洗，然后用纸擦拭有助于清洁和加快干燥。连续添加丙烯酰胺的样品：BIS，水，缓冲溶液，过硫酸铵，Temed。好好摇动，立即倒入。
在聚合之前不必在聚丙烯酰胺上脱脂。 （丙烯酰胺过去被放置在真空中以去除气泡，因为氧抑制了聚合。）
水平胶点样品尖端。
·在底部的盒子里放一块黑纸，黑色背景以制作一些样品孔以更清楚地看到。
·胶水罐填充的缓冲液，就在胶体上。
·如果边缘有灯，请打开灯光，让光线照射胶体。将样品吸入移液器中。
·使用自动移液设备。
·在10-200 MU中，可以在样品上的大多数点中使用液体运动点。对于非常小的样品孔（小于10μ1），用于测序胶的长移液器头更方便。
·移液只是沉浸在样品中，吸入缓慢移动的流体。样品可能与甘油看起来很粘，快速抽水可能会将气泡吸入移液器头部。
·吸入移液头后的样品将在管道边缘轻轻移动流体头或擦拭纸纸在液滴外面吸液头。注意不要吸样品。
将样品放入样品孔中
·移液设备以保持一点压力，使样品稍微移动溢出液头。
·插入缓冲液的移液头略高于斑点孔，保持正压。移液器的尖端可以插入一个小孔中。
·缓慢而稳定的样品。移液尖端放在点样品孔的上方，样品将沉入孔中。让样品下沉以填充样品孔而不是推入。
·一旦最后一滴液体头的样品，液体将移至第二条腿，慢慢提高液体移动，从缓冲区移出
如何进行垂直胶水采样？
·两片玻璃之间形成的垂直胶点样品孔。在非常薄的胶水中，甚至无法将移液器头插入两个玻璃板之间。观看甘油！将移液器头放在样品孔上，样品将沉入孔中。
·以前点样品，请确保将聚丙烯酰基凝胶样品孔的垂直点冲洗干净。洗净样品孔底部可能出现的未加工丙烯酰胺和水。水可以使样品孔明显较小。使用25毫升或50毫升注射器和18号针头。倒入电泳缓冲液，然后小心地冲洗样品孔。
·可能很难看到样品孔，但是在同一样品孔中，其余的很容易。如果有多余的孔，则可以用溴酚蓝进行样品缓冲液。
时间：MAR-31-2023